如何選擇高效液相色譜柱

如何選擇高效液相色譜柱
1、正相色譜
正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica），以及其他具有極性官能團，如胺基團(ZH2,APS)和氰基團（CN，CPS）的鍵合相填料。
由于硅膠表面的硅羥基（SiOH）或其他團的極性教強，因此，分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小，即極性強落的組份*先被沖洗出色譜柱。
正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低，如：正乙烷（Hexane）,氯（Chloroform）二氯甲烷（Methylence Chloride）等.
2、反相色譜
反相色譜填料常是以硅膠為基礎，表面鍵合有極性相對教弱的官能團的鍵合相。
反相色譜所使用的流動相極性教強，通常為水，緩沖液與甲醇，已腈等混合物。
樣品流出色譜柱的順序是極性教強組合*先被沖出，而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留。
常用的反相填料有C18（ODS） C8（MOS）。C4（B）C6H5（Phenyl）等。http://www.ba17.com/LC-Column/Category380.aspx
3、聚合物填料：
聚合物調料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸至等，其主要優點是在PG值為1-14均可使用。
相對與硅膠基質的C18填料，這類填料具有更強的淑水性；大孔的聚合物填料對蛋白質等樣品的分離非常有效。
現在的聚合物填料的缺點是相對硅膠基質填料，色譜柱柱效教低。
4、其他無機填料
其它HPLC的無機填料色譜柱也已經商品化。由于其特殊的性質，一般**于特殊的用途。如墨化碳也用于正逐漸成為反相色譜填料。這種填料的分離不同與硅膠基質烷基鍵合相，石墨化碳的表面即是保留的基礎，不再需其它的表面改性，該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強，石墨化碳可用于分離某些幾何導構體，又由于HPLC流動相中不會被溶解，這類柱可在任何PH與溫度下使用。氧化鋁也可用于HPLC，氧化鋁微粒剛性強，可制成穩定的色譜柱柱床，其優點是可在PH高達12的流動相中使用。但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強，應用范圍受到一定的限制，所以未能廣泛應用，新型氧化誥填料也可用于   HPLC，商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化誥微球色譜柱，應用PH范圍1~14，溫度可達到1000C。由于氧化誥填料幾年才開始研究，加之前的實驗難度，其重要用途與優勢尚在進行中。http://www.ba17.com/LC-Column/Category380.aspx