如何選擇高效液相色譜柱

如何選擇高效液相色譜柱
1、正相色譜
正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica），以及其他具有極性官能團(tuán)，如胺基團(tuán)(ZH2,APS)和氰基團(tuán)（CN，CPS）的鍵合相填料。
由于硅膠表面的硅羥基（SiOH）或其他團(tuán)的極性教強(qiáng)，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小，即極性強(qiáng)落的組份*先被沖洗出色譜柱。
正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低，如：正乙烷（Hexane）,氯（Chloroform）二氯甲烷（Methylence Chloride）等.
2、反相色譜
反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ)，表面鍵合有極性相對(duì)教弱的官能團(tuán)的鍵合相。
反相色譜所使用的流動(dòng)相極性教強(qiáng)，通常為水，緩沖液與甲醇，已腈等混合物。
樣品流出色譜柱的順序是極性教強(qiáng)組合*先被沖出，而極性弱的組份會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。
常用的反相填料有C18（ODS） C8（MOS）。C4（B）C6H5（Phenyl）等。http://www.ba17.com/LC-Column/Category380.aspx
3、聚合物填料：
聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸至等，其主要優(yōu)點(diǎn)是在PG值為1-14均可使用。
相對(duì)與硅膠基質(zhì)的C18填料，這類填料具有更強(qiáng)的淑水性；大孔的聚合物填料對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。
現(xiàn)在的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料，色譜柱柱效教低。
4、其他無(wú)機(jī)填料
其它HPLC的無(wú)機(jī)填料色譜柱也已經(jīng)商品化。由于其特殊的性質(zhì)，一般**于特殊的用途。如墨化碳也用于正逐漸成為反相色譜填料。這種填料的分離不同與硅膠基質(zhì)烷基鍵合相，石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ)，不再需其它的表面改性，該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強(qiáng)，石墨化碳可用于分離某些幾何導(dǎo)構(gòu)體，又由于HPLC流動(dòng)相中不會(huì)被溶解，這類柱可在任何PH與溫度下使用。氧化鋁也可用于HPLC，氧化鋁微粒剛性強(qiáng)，可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床，其優(yōu)點(diǎn)是可在PH高達(dá)12的流動(dòng)相中使用。但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強(qiáng)，應(yīng)用范圍受到一定的限制，所以未能廣泛應(yīng)用，新型氧化誥填料也可用于   HPLC，商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化誥微球色譜柱，應(yīng)用PH范圍1~14，溫度可達(dá)到1000C。由于氧化誥填料幾年才開始研究，加之前的實(shí)驗(yàn)難度，其重要用途與優(yōu)勢(shì)尚在進(jìn)行中。http://www.ba17.com/LC-Column/Category380.aspx